Sikiön fibronektiinin pikatesti
KÄYTTÖOHJEET
Vahva askel®PROM-testi on visuaalisesti tulkittu immunokromatografinen testi, joka on tarkoitettu käytettäväksi sikiön fibronektiinin kvalitatiiviseen havaitsemiseen kohdunkaulan eritteistä.Sikiön fibronektiinin esiintyminen kohdunkaulan eritteissä 22 viikon, 0 päivän ja 34 viikon, 6 päivän raskausajan välillä onliittyy kohonneeseen ennenaikaisen synnytyksen riskiin.
JOHDANTO
Ennenaikainen synnytys, jonka American College of Obstetricians and Gynecologists määrittelee synnytykseksi ennen 37. raskausviikkoa, on vastuussa suurimmasta osasta ei-kromosomaalista perinataalista sairastuvuutta ja kuolleisuutta.Uhan ennenaikaisen synnytyksen oireita ovat kohdun supistukset, emättimen vuodon muuttuminen, verenvuoto emättimestä, selkäkipu, vatsakipu, lantion paine ja kouristukset.Diagnostisia menetelmiä uhanalaisen ennenaikaisen synnytyksen tunnistamiseksi ovat kohdun toiminnan seuranta ja digitaalinen kohdunkaulan tutkimus, jonka avulla voidaan arvioida kohdunkaulan mitat.Näiden menetelmien on osoitettu olevan rajallisia, koska minimaalinen kohdunkaulan laajeneminen (< 3 senttimetriä) ja kohdun aktiivisuus tapahtuvat normaalisti, eivätkä ne välttämättä ole diagnoosin uhkaavasta ennenaikaisesta synnytyksestä.Vaikka useita seerumin biokemiallisia markkereita on arvioitu, yhtäkään ei ole yleisesti hyväksytty käytännön kliiniseen käyttöön.
Sikiön fibronektiini (fFN), fibronektiinin isomuoto, on monimutkainen tarttuva glykoproteiini, jonka molekyylipaino on noin 500 000 daltonia.Matsuura ja työtoverit ovat kuvanneet monoklonaalisen vasta-aineen nimeltä FDC-6, joka tunnistaa spesifisesti III-CS:n, alueen, joka määrittää fibronektiinin sikiön isomuodon.Istukan immunohistokemialliset tutkimukset ovat osoittaneet, että fFN onrajoittuu liitoksen määrittelevän alueen solunulkoiseen matriisiinäidin ja sikiön yksiköt kohdussa.
Sikiön fibronektiini voidaan havaita naisten kohdunkaulan eritteistä koko raskauden ajan käyttämällä monoklonaalista vasta-ainepohjaista immuunimääritystä.Sikiön fibronektiini on kohonnut kohdunkaulan eritteissä raskauden alkuvaiheessa, mutta normaalissa raskaudessa se vähenee 22 viikosta 35 viikolle.Sen merkitystä emättimessä raskauden alkuviikkojen aikana ei ymmärretä.Se voi kuitenkin yksinkertaisesti heijastaa ekstravilloisen trofoblastipopulaation ja istukan normaalia kasvua.FFN:n havaitsemisen kohdunkaulan eritteissä 22 viikon, 0 päivän ja 34 viikon raskausviikon ja 6 päivän raskausajan välillä on raportoitu liittyvän ennenaikaiseen synnytykseen oireettomilla ja 22 viikon, 0 päivän ja 30 viikon, 6 päivän välillä oireettomilla raskaana olevilla naisilla.
PERIAATE
Vahva askel®fFN Test käyttää väri-immunokromatografiaa, kapillaarivirtaustekniikkaa.Testimenettely edellyttää fFN:n liuottamista emättimen vanupuikosta sekoittamalla vanupuikko näytepuskuriin.Sitten sekoitettu näytepuskuri lisätään testikasetin näytekaivoon ja seos kulkeutuu pitkin kalvon pintaa.Jos näytteessä on fFN:ää, se muodostaa kompleksin ensisijaisen anti-fFN-vasta-aineen kanssa, joka on konjugoitu värillisiin partikkeleihin.Sitten kompleksi sitoutuu toisella anti-fFN-vasta-aineella, joka on päällystetty nitroselluloosakalvolla.Näkyvän testiviivan ilmestyminen kontrolliviivan rinnalle osoittaa positiivisen tuloksen.
SARJAN OSAT
| 20 Yksittäin sacked testilaitteet | Jokainen laite sisältää nauhan, jossa on värillisiä konjugaatteja ja reaktiivisia reagensseja, jotka on esipinnoitettu vastaavilla alueilla. |
| 2PoistoPuskuripullo | 0,1 M fosfaattipuskuroitu suolaliuos (PBS) ja 0,02 % natriumatsidi. |
| 1 positiivinen kontrollipuikko (vain pyynnöstä) | Sisältää fFN:ää ja natriumatsidia.Ulkoiseen ohjaukseen. |
| 1 Negatiivinen kontrollipuikko (vain pyynnöstä) | Ei sisällä fFN:ää.Ulkoiseen ohjaukseen. |
| 20 Poistoputket | Näytteiden valmisteluun. |
| 1 Työasema | Paikka puskuripulloille ja -putkille. |
| 1 Pakkausseloste | Käyttöohjeita varten. |
VAADITTAVAT MATERIAALIT, MUTTA EI TOIMITETA
| Ajastin | Ajoituskäyttöön. |
VAROTOIMENPITEET
■ Vain ammattimaiseen in vitro -diagnostiikkakäyttöön.
■ Älä käytä pakkaukseen merkityn viimeisen käyttöpäivämäärän jälkeen.Älä käytä testiä, jos sen foliopussi on vaurioitunut.Älä käytä testejä uudelleen.
■ Tämä pakkaus sisältää eläinperäisiä tuotteita.Sertifioitu tieto eläinten alkuperästä ja/tai terveydentilasta ei täysin takaa tarttuvien taudinaiheuttajien puuttumista.Siksi on suositeltavaa, että näitä tuotteita käsitellään potentiaalisesti tarttuvina ja niitä käsitellään noudattaen tavanomaisia varotoimia (älä niele tai hengitä).
■ Vältä näytteiden ristikontaminaatio käyttämällä uutta näytteenkeräysastiaa jokaiselle näytteelle.
■ Lue koko toimenpide huolellisesti ennen testien suorittamista.
■ Älä syö, juo tai tupakoi alueella, jossa näytteitä ja sarjoja käsitellään.Käsittele kaikkia näytteitä ikään kuin ne sisältäisivät tartunta-aineita.Noudata vahvistettuja varotoimia mikrobiologisten vaarojen varalta koko toimenpiteen ajan ja noudata näytteiden asianmukaisen hävittämisen vakiomenettelyjä.Käytä suojavaatetusta, kuten laboratoriotakkia, kertakäyttökäsineitä ja silmäsuojaimia, kun näytteitä määritetään.
■ Älä vaihda tai sekoita eri erien reagensseja.Älä sekoita liuospullojen korkkeja.
■ Kosteus ja lämpötila voivat vaikuttaa haitallisesti tuloksiin.
■ Kun määritys on valmis, hävitä vanupuikko huolellisesti sen jälkeen, kun ne on autoklaavissa 121 °C:ssa vähintään 20 minuuttia.Vaihtoehtoisesti niitä voidaan käsitellä 0,5-prosenttisella natriumhypokloridilla (tai kotitalousvalkaisuaineella) tunnin ajan ennen hävittämistä.Käytetyt testimateriaalit tulee hävittää paikallisten, osavaltioiden ja/tai liittovaltion määräysten mukaisesti.
■ Älä käytä sytologiaharjoja raskaana olevien potilaiden kanssa.
VARASTOINTI JA STABIILISUUS
■ Sarja tulee säilyttää 2-30°C:ssa suljettuun pussiin painettuihin käyttöikoihin asti.
■ Testin on oltava suljetussa pussissa käyttöön asti.
■ Ei saa jäätyä.
■ Tämän sarjan komponentit on suojattava saastumiselta.Älä käytä, jos on todisteita mikrobikontaminaatiosta tai saostumisesta.Annostelulaitteiden, säiliöiden tai reagenssien biologinen kontaminaatio voi johtaa vääriin tuloksiin.
OTTEIDEN KERÄÄMINEN JA SÄILYTYS
■ Käytä vain Dacron- tai Rayon-kärkisiä steriilejä vanupuikkoja, joissa on muovivarret.On suositeltavaa käyttää sarjojen valmistajan toimittamaa vanupuikkoa (puikkoja ei sisälly tähän sarjaan, tilaustiedot saat ottamalla yhteyttä valmistajaan tai paikalliseen jälleenmyyjään, luettelonumero on 207000).Muiden toimittajien vanupuikkoja ei ole validoitu.Vanupuikkoja, joissa on puuvillakärki tai puiset varret, ei suositella.
■ Kohdunkaulan eritteet saadaan emättimen takaosasta.Keräysprosessi on tarkoitettu hellävaraiseksi.Mikrobiologisille viljelmille yleistä voimakasta tai voimakasta keräämistä ei vaadita.Speulum-tutkimuksen aikana, ennen kuin aloitat kohdunkaulan tai emättimen tutkimukset tai manipulaatiot, käännä applikaattorin kärkeä kevyesti emättimen takaosan poikki noin 10 sekunnin ajan kohdunkaulan tai emättimen eritteiden imemiseksi.Myöhemmät yritykset kyllästää asettimen kärki voivat mitätöidä testin.Irrota applikaattori ja suorita testi alla olevien ohjeiden mukaisesti.
■ Aseta vanupuikko uuttoputkeen, jos testi voidaan suorittaa välittömästi.Jos välitön testaus ei ole mahdollista, potilasnäytteet tulee sijoittaa kuivaan kuljetusputkeen säilytystä tai kuljetusta varten.Vanupuikkoja voidaan säilyttää 24 tuntia huoneenlämmössä (15-30 °C) tai 1 viikko 4 °C:ssa tai enintään 6 kuukautta -20 °C:ssa.Kaikkien näytteiden tulee antaa lämmetä huoneenlämpötilaan 15-30 °C ennen testausta.
MENETTELY
Tuo testit, näytteet, puskuri ja/tai kontrollit huoneenlämpöön (15-30°C) ennen käyttöä.
■ Aseta puhdas poistoputki sille varattuun paikkaan työasemassa.Lisää 1 ml uuttopuskuria uuttoputkeen.
■ Aseta näytepuikko putkeen.Sekoita liuosta voimakkaasti pyörittämällä pumpulipuikkoa voimakkaasti putken kylkeä vasten vähintään kymmenen kertaa (kun se on upotettuna).Parhaat tulokset saadaan, kun näytettä sekoitetaan voimakkaasti liuokseen.
■ Purista vanupuikosta mahdollisimman paljon nestettä puristamalla joustavan poistoputken sivua, kun vanupuikko poistetaan.Vähintään 1/2 näytepuskuriliuoksesta on jäätävä putkeen, jotta kapillaari kulkeutuu riittävästi.Laita korkki ulosvedetyn putken päälle.
Hävitä vanupuikko sopivaan biovaarallisen jätteen säiliöön.
■ Uutetut näytteet voivat säilyä huoneenlämmössä 60 minuuttia vaikuttamatta testin tulokseen.
■ Poista testi suljetusta pussistaan ja aseta se puhtaalle, tasaiselle pinnalle.Merkitse laitteeseen potilaan tai kontrollin tunniste.Parhaan tuloksen saavuttamiseksi määritys on suoritettava tunnin sisällä.
■ Lisää 3 tippaa (noin 100 µl) uutettua näytettä uuttoputkesta testikasetin näytekyvennykseen.
Vältä jäämästä ilmakuplia näytekuoppaan (S), äläkä pudota liuosta havaintoikkunaan.
Kun testi alkaa toimia, näet värin liikkuvan kalvon poikki.
■ Odota, että värilliset nauhat tulevat näkyviin.Tulos tulee lukea 5 minuutin kuluttua.Älä tulkitse tulosta 5 minuutin kuluttua.
Hävitä käytetyt koeputket ja testikasetit sopivaan biovaarallisen jätteen säiliöön.
TULOSTEN TULKINTA
| POSITIIVINENTULOS:
| Kalvolle ilmestyy kaksi värillistä nauhaa.Yksi juova näkyy kontrollialueella (C) ja toinen vyöhyke näkyy testialueella (T). |
| NEGATIIVINENTULOS:
| Vain yksi värillinen nauha näkyy ohjausalueella (C).Testialueella (T) ei näy näkyvää värillistä nauhaa. |
| VIRHEELLINENTULOS:
| Ohjausnauha ei tule näkyviin.Tulokset kaikista testeistä, jotka eivät ole tuottaneet kontrollikaistaa määritellyllä lukuajalla, on hylättävä.Tarkista menettely ja toista se uudella testillä.Jos ongelma jatkuu, lopeta sarjan käyttö välittömästi ja ota yhteyttä paikalliseen jälleenmyyjään. |
MERKINTÄ:
1. Värin intensiteetti testialueella (T) voi vaihdella riippuen näytteessä olevien kohdennettujen aineiden pitoisuudesta.Mutta ainetasoa ei voida määrittää tällä kvalitatiivisella testillä.
2. Riittämätön näytetilavuus, väärä toimintamenettely tai vanhentuneiden testien suorittaminen ovat todennäköisimpiä syitä ohjauskaistan epäonnistumiseen.
LAADUNVALVONTA
■ Testiin sisältyy sisäisiä menettelyohjeita.Kontrollialueelle (C) ilmestyvää värillistä nauhaa pidetään sisäisenä positiivisena menettelykontrollina.Se vahvistaa riittävän näytetilavuuden ja oikean menettelytavan.
■ Sarjoissa voi olla (vain pyynnöstä) ulkoisia valvontalaitteita, joilla varmistetaan, että testit toimivat oikein.Ohjauksia voidaan myös käyttää osoittamaan testaajan asianmukaisen suorituskyvyn.Suorita positiivinen tai negatiivinen kontrollitesti suorittamalla Testimenettely-osion vaiheet ja käsittelemällä kontrollipuikkoa samalla tavalla kuin vanupuikkonäytteitä.
TESTIN RAJOITUKSET
1. Tätä määritystä voidaan käyttää vain sikiön fibronektiinin kvalitatiiviseen havaitsemiseen kohdunkaulan eritteissä.
2. Testituloksia tulee aina käyttää yhdessä muiden kliinisten ja laboratoriotietojen kanssa potilaan hoidossa.
3. Näytteet tulee ottaa ennen digitaalista tutkimusta tai kohdunkaulan käsittelyä.Kohdunkaulan manipulaatiot voivat johtaa vääriin positiivisiin tuloksiin.
4. Näytteitä ei pidä ottaa, jos potilas on ollut sukupuoliyhteydessä 24 tunnin sisällä väärien positiivisten tulosten poistamiseksi.
5. Potilaita, joilla epäillään tai tiedetään istukan irtoamista, istukan previaa tai kohtalaista tai voimakasta emättimen verenvuotoa, ei tule testata.
6. Potilaita, joilla on cerclage, ei tule testata.
7. StrongStepin suorituskykyominaisuudet®fFN-testit perustuvat tutkimuksiin naisilla, joilla on yksittäinen raskaus.Suorituskykyä ei ole varmistettu potilailla, joilla on useita raskauksia, esim. kaksoset.
8. Vahva askel®fFN-testiä ei ole tarkoitettu suoritettavaksi lapsivesikalvojen repeämien yhteydessä, ja lapsivesikalvojen repeämä on suljettava pois ennen testin suorittamista.
SUORITUSKYVYN OMINAISUUDET
Taulukko: StrongStep® fFN-testi vs. toisen merkin fFN-testi
| Suhteellinen herkkyys: 97,96 % (89,13–99,95 %)* Suhteellinen spesifisyys: 98,73 % (95,50–99,85 %)* Kokonaissopimus: 98,55 % (95,82–99,70 %)* *95 %:n luottamusväli |
| Toinen merkki |
| ||
| + | - | Kaikki yhteensä | |||
| StrongStep®fFn Testata | + | 48 | 2 | 50 | |
| - | 1 | 156 | 157 | ||
|
| 49 | 158 | 207 | ||
Analyyttinen herkkyys
Pienin havaittava fFN-määrä uutetussa näytteessä on 50 µg/l.
Oireista kärsivillä naisilla fFN:n kohonneet tasot (≥ 0,050 μg/ml) (1 x 10-7 mmol/L) 24 viikon, 0 päivän ja 34 viikon, 6 päivän välillä viittaavat lisääntyneeseen synnytysriskiin ≤ 7 tai ≤ 14 päivän kuluttua näytekokoelma.Oireettomilla naisilla kohonneet fFN-tasot 22 viikon, 0 päivän ja 30 viikon ja 6 päivän välillä viittaavat lisääntyneeseen synnytysriskiin ≤ 34 viikon, 6 raskauspäivän aikana.Raja-arvo 50 µg/l fFN määritettiin monikeskustutkimuksessa, joka suoritettiin sikiön fibronektiinin ilmentymisen raskauden aikana ja ennenaikaisen synnytyksen välisen yhteyden arvioimiseksi.
Häiritsevät aineet
On varottava, ettei applikaattori tai kohdunkaulan eritteet saastuta voiteluaineilla, saippuoilla, desinfiointiaineilla tai voiteilla.Voiteluaineet tai voiteet voivat fyysisesti häiritä näytteen imeytymistä applikaattoriin.Saippuat tai desinfiointiaineet voivat häiritä vasta-aine-antigeenireaktiota.
Mahdollisia häiritseviä aineita testattiin pitoisuuksina, joita voidaan kohtuudella löytää kohdunkaulan eritteistä.Seuraavat aineet eivät häirinneet määritystä, kun niitä testattiin osoitetuilla tasoilla.
| Aine | Keskittyminen | Aine | Keskittyminen |
| Ampisilliini | 1,47 mg/ml | Prostaglandiini F2 | a0,033 mg/ml |
| Erytromysiini | 0,272 mg/ml | Prostaglandiini E2 | 0,033 mg/ml |
| Äidin virtsa 3. kolmannes | 5 % (tilavuus) | MonistatR (mikonatsoli) | 0,5 mg/ml |
| Oksitosiini | 10 IU/ml | Indigo Carmine | 0,232 mg/ml |
| Terbutaliini | 3,59 mg/ml | Gentamysiini | 0,849 mg/ml |
| Deksametasoni | 2,50 mg/ml | BetadineR geeli | 10 mg/ml |
| MgS04•7H2O | 1,49 mg/ml | BetadineR puhdistusaine | 10 mg/ml |
| Ritodriini | 0,33 mg/ml | K-YR Jelly | 62,5 mg/ml |
| DermicidolR 2000 | 25,73 mg/ml |
KIRJALLISUUTTA
1. American College of Obstetricians and Gynecologists.Ennenaikainen synnytys.Tekninen tiedote, numero 133, lokakuu 1989.
2. Creasy RK, Resnick R. Äidin ja sikiön lääketiede: periaatteet ja käytäntö.Philadelphia: WB Saunders;1989.
3. Creasy RK, Merkatz IR.Ennenaikaisen synnytyksen ehkäisy: kliininen lausunto.Obstet Gynecol 1990; 76 (lisäosa 1): 2S–4S.
4. Morrison JC.Ennenaikainen synnytys: ratkaisemisen arvoinen arvoitus.Obstet Gynecol 1990; 76 (Suppl 1): 5S-12S.
5. Lockwood CJ, Senyei AE, Dische MR, Casal DC, et ai.Sikiön fibronektiini kohdunkaulan ja emättimen eritteissä ennenaikaisen synnytyksen ennustajana.New Engl J Med 1991;325:669–74.
SYMBOLIEN SANASTO
|
| Luettelonumero |  | Lämpötilan rajoitus |
 | Katso käyttöohjeet |
| Eränumero |
 | In vitro -diagnostiikkaan tarkoitettu lääketieteellinen laite |  | Käytä viimeistään |
 | Valmistaja |  | Sisältää riittävästitestejä |
 | Älä käytä uudelleen |  | Valtuutettu edustaja Euroopan yhteisössä |
 | CE-merkintä IVD-lääketieteellisiä laitteita koskevan direktiivin 98/79/EY mukaisesti | ||
Liming Bio-Products Co., Ltd.
No. 12 Huayuan Road, Nanjing, Jiangsu, 210042 PR Kiina.
Puh: (0086)25 85476723 Faksi: (0086)25 85476387
Sähköposti:sales@limingbio.com
Verkkosivusto: www.limingbio.com
www.stddiagnostics.com
www.stidiagnostics.com
WellKang Ltd. (www.CE-marking.eu) Puh: +44(20)79934346
29 Harley St., Lontoo WIG 9QR, UK Faksi: +44(20)76811874
StrongStep® Sikiön fibronektiinin pikatestilaite
Ennenaikainen synnytys, jonka American College of Obstetricians and Gynecologists määrittelee synnytykseksi ennen 37. raskausviikkoa, on vastuussa suurimmasta osasta ei-kromosomaalista perinataalista sairastuvuutta ja kuolleisuutta.Uhan ennenaikaisen synnytyksen oireita ovat kohdun supistukset, emättimen vuodon muuttuminen, verenvuoto emättimestä, selkäkipu, vatsakipu, lantion paine ja kouristukset.Diagnostisia menetelmiä uhanalaisen ennenaikaisen synnytyksen tunnistamiseksi ovat kohdun toiminnan seuranta ja digitaalinen kohdunkaulan tutkimus, jonka avulla voidaan arvioida kohdunkaulan mitat.
StrongStep® Fetal Fibronectin Rapid Test on visuaalisesti tulkittu immunokromatografinen testi, joka on tarkoitettu käytettäväksi sikiön fibronektiinin kvalitatiiviseen havaitsemiseen kohdunkaulan eritteistä, joilla on seuraavat ominaisuudet:
Käyttäjäystävällinen:yksivaiheinen menettely kvalitatiivisessa testauksessa
Nopea:tarvitaan vain 10 minuuttia saman potilaskäynnin aikana
Varusteeton:lähteitä rajoittavat sairaalat tai kliiniset tilat voivat suorittaa tämän testin
Toimitettu:huoneenlämpötila (2℃-30℃)
